摘要:目的本课题组前期研究证实组蛋白甲基转移酶2(SET and MYND domain-containing protein 2,SMYD2)高水平表达在肝癌细胞进展过程中发挥重要作用。MiR-200b作为肿瘤抑制基因参与多种肿瘤的发生和发展。本研究旨在探究miR-200b与SMYD2在肝癌中的作用机制。方法采用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及蛋白质印迹法分别检测癌组织及癌旁组织中SMYD2和miR-200b的表达水平。通过双荧光素酶报告验证SMYD2与miR-200b的靶向关系。通过沉默及过表达miR-200b研究其对SMYD2及下游p53/CyclinE1通路的影响,并通过沉默SMYD2研究其对肝癌细胞株的增殖及细胞周期蛋白(Cyclin)E1的影响,进一步证实SMYD2与p53/CyclinE1的关系。结果与癌旁组织相比,肝癌组织中miR-200b表达显著减少,而SMYD2表达显著增加(均P<0.05),SMYD2与miR-200b呈负相关(P<0.01)。双荧光素酶报告结果显示:在工具细胞HEK 293T细胞中,miR-200b直接靶向结合SMYD2并抑制其表达。在肝癌细胞株MHCC-97L中下调miR-200b可增加SMYD2的表达(P<0.01)并促进肝癌细胞的增殖(P<0.05),上调miR-200b则得出相反的结果。在MHCC-97L细胞株中沉默SMYD2可抑制细胞的增殖(P<0.01),并导致p53水平的升高和CyclinE1表达的下降(均P<0.05)。结论MiR-200b通过靶向结合SMYD2及调控p53/CyclinE1通路参与肝癌的进展,有望成为治疗肝癌细胞的新靶点。
摘要:目的水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)是最常见引起病毒性脑膜炎/脑炎的致病菌之一.VZV脑膜炎/脑炎早期临床表现和脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)变化缺乏特异性,容易被误诊为其他病毒性脑炎或结核性脑膜炎。因此本研究探讨VZV脑膜炎/脑炎与中枢神经系统(central nervous system,CNS)单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染的临床特征、CSF结果及CSF细胞因子水平的区别。方法回顾性研究2018年1月至2021年6月中南大学湘雅三医院神经内科细胞学实验室确诊的157例CNS感染患者的医疗记录,其中感染HSV 49例(HSV-1 45例,HSV-2 4例),VZV 55例,MTB 53例。收集的3组数据,包括人口学特征、实验室结果、影像学结果和疾病结局。对68例(13例HSV,22例VZV和33例MTB)患者CSF中的12个细胞因子(IL-1β,IL-2,IL-4,IL-5,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12p70,IL-17,IFN-γ,IFN-α,TNF-α)水平进行检测。比较3组患者的临床和实验室资料。结果3组患者最常见的临床表现是发热、头痛、呕吐和颈部僵硬。HSV和VZV CNS疾病的临床表现相似。与HSV和MTB组相比,VZV组发热(63.6% vs 87.8% vs 96.2%,P<0.001)和意识改变(14.5% vs 26.5% vs 47.2%,P=0.004)更少见。VZV组有7例(12.7%)患者出现皮肤带状疱疹。VZV组(230×106/mL)和MTB组(276×106/mL)CSF白细胞计数显著高于HSV组(87×106/mL,P=0.002),此外,VZV组CSF蛋白水平显著高于HSV组(1 034 mg/L vs 694 mg/L,P=0.011),但低于MTB组(1 744 mg/L,P<0.001)。所测细胞因子中,3组IL-6(VZV vs HSV vs MTB:2 855.93 pg/mL vs 2 128.26 pg/mL vs 354.77 pg/mL,P=0.029)、IL-8(VZV vs HSV vs MTB:4 001.46 pg/mL vs 1 578.11 pg/mL vs 1 023.25 pg/mL,P=0.046)水平比较差异有统计学意义,其中VZV组IL-6和IL-8水平显著升高。事后分析显示:VZV组的IL-6和IL-8明显高于MTB组(分别为P=0.002和P=0.035),但与HSV组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论VZV脑膜炎/脑炎表现为CSF高细胞数和高蛋白质,这改变了我们对病毒性脑炎CSF谱的传统认识。VZV脑膜炎/脑炎患者CSF IL-6和IL-8水平升高,提示这些患者的炎症反应更为强烈。
摘要:目的糖尿病前期(prediabetes,PD)与认知缺陷及神经退行性疾病的风险增加有关。然而,PD相关脑疾病的机制尚不明确。PD患者的脑灰质和脑白质会发生不同程度的损害,这些神经结构的改变可能会影响大尺度脑网络的组织。灰质协变网络在推断大规模脑结构网络中具有重要价值。但PD是否影响灰质结构网络的拓扑特性尚不清楚。本研究旨在通过图论分析方法探讨PD患者中脑灰质结构协变网络拓扑特征的变化。方法本研究纳入48名受试者,包括23名PD患者(PD组)和年龄、性别匹配的25名正常对照(Ctr组)。采用3.0 T磁共振机器采集所有患者的头部高分辨三维T1结构像图像;采用简易智力状态检查量表(Mini-mental State Examination,MMSE)评估患者的认知状态;使用自动解剖标记(anatomical automatic labeling,AAL)模板计算116个脑区的灰质体积,通过区域间结构相关矩阵的阈值处理和图论分析构建灰质结构协方差网络;采用曲线下面积(area under the curve,AUC)联合非参数检验对小世界参数、标准化聚类系数、标准化路径长度、全局效率、特征路径长度及网络稳健性等参数的组间差异进行分析。结果两组灰质结构网络均遵循小世界属性,表现为小世界指数大于1,标准化聚类系数远高于1及标准化路径长度接近1。与Ctr组比较,PD组灰质结构网络的小世界指数、标准化路径长度及标准化聚类系数均增加,其中标准化聚类系数在0.12~0.16的网络稀疏度范围内高于Ctr组,但AUC分析显示两组各参数差异均无统计学意义(均P>0.05)。对于网络整合指标,PD组灰质结构网络表现为特征路径长度增加及全局效率降低,其中特征路径长度在0.12~0.16范围内较Ctr组增加,但AUC分析发现二者的组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。对于网络分离指标,PD组灰质结构网络表现为局部效率和平均聚类系数显著增高,AUC分析显示PD组的局部效率(P=0.001)和平均聚类系数(P=0.004)显著高于Ctr组。网络稳健性分析结果显示:PD组灰质结构网络较Ctr组更加容易受到随机损害(P=0.001)。结论PD患者的灰质结构网络较正常对照表现出平均聚类系数及局部效率增加及更容易受到随机损害的特性,提示PD患者的灰质结构协变网络拓扑组织特性发生了改变,表现为网络分离属性增加及网络稳健性降低,这可能为PD患者相关脑损害提供了新证据。
摘要:目的近年来采用生物法合成金属纳米粒子受到广泛关注,广大研究者试图寻找对环境污染小、易于制备的生物法来合成纳米银粒子(silver nanoparticles,AgNPs),并探究制备条件对合成AgNPs的影响。本研究旨在采用生物法合成粒径可控、效果良好的AgNPs,并对比其与化学法制备AgNPs的生物活性差异。方法本研究分别以口蘑水提液(water extract of Tricholomagambosum,WET)、卷曲乳杆菌发酵上清液(cell-free supernatant of Lactobacillus crispatus,CFS)为还原剂及保护剂,AgNO3溶液为前驱体,采用生物法制备AgNPs,同时采用柠檬酸钠化学法合成AgNPs。研究温度、pH、提取液用量、光照条件对生物法合成AgNPs的影响,并对所合成的AgNPs进行表征分析,最后对比上述3种AgNPs的抗菌效果以及对细胞的毒性和选择性。结果各种表征证明上述3种方法都成功合成了AgNPs。2种生物法制备的AgNPs(WET-AgNPs和CFS-AgNPs)受pH及温度的影响较大,且都比化学法制备的AgNPs抑菌效果好(均P<0.01);其中,WET-AgNPs的抑菌效果比CFS-AgNPs略好。与化学法制备的AgNPs相比,WET-AgNPs和CFS-AgNPs对正常细胞的毒性低(均P<0.01),其中CFS-AgNPs在浓度为480 μg/mL时细胞选择性较好。结论WET和CFS可以合成具有生物活性的AgNPs,且与化学法制备的AgNPs有生物活性的差异。